真空吸種置床儀對葡萄種子的培養分析
葡萄種子的發芽率是影響葡萄產量以及口感的一個重要原因,同時由于葡萄有種皮所含抑制物質及機械障礙,即使有成熟胚也難以萌發,但若將成熟胚取出在培養基上萌發,則會提高萌發率且可省去低溫處理過程。因此我們設計了使用真空吸種置床儀對葡萄種子培養進行胚發育,再結合胚培養以提高萌發率的方法,獲得了較好的結果。
l 材料與方法
試驗于2004~2005年在西北農業大學進行,試材為歐洲葡萄極早熟品種莎巴珍珠。
用0.1%升汞水溶液將果實表面消毒10分鐘,無菌水沖洗3~5次,于無菌條件下肺剖出種子,在培養基上培養。所用基本培養基為MS+5%蔗糖十0.6%瓊脂十LH100ppm.
種子培養結束后解剖出胚,在顯微鏡下測量胚長,作為處理物劣的指標。從基本培養基上培養二個月的種子中取出胚進行培養。胚培養所用基本培養基為胚萌發標準是子葉張開并轉綠。培養基pH均調至5.8,培養溫度為25士1℃。種子培養在室內自然散射光下進行,胚培養用日光燈作光源,光強2000一3000勒克斯,每日光照15小時。
2 結果與討論
2.1影響種子培養的因素
2.1.1取樣時期于莎巴珍珠果實成熟前一周、成熟期及成熟后一周各取樣(種子)一次,培養二個月后測量胚長。結果表明,成熟前一周取樣的效果最好,培養后的胚長極顯著地大于成熟期和成熟后一周取樣的結果,而成熟期及成熟后一周取樣經培養,其胚長間無顯著差異(見表1)。在種子培養過程中,隨著胚長的增加,胚的形態發育也漸趨成熟。取樣時期對胚的形態發育也有明顯影響(表2),如成熟前一周取樣,培養后胚的形態分布集中,以子葉胚為主,占70%,而另兩次培養的其胚形態發育不整齊,心形胚、魚,雷形胚和子葉形胚比例相近。
2.1.2種子培養持續天數莎巴珍珠果實成熟時胚長為592卜m,此時取樣的種子培養30,60和90天后,胚長分別達844,953及929協m,均極顯著地大于培養前的胚長,但它們之間則沒有顯著差異。這說明培養3.天已足夠,若再延長培養時間,則胚長增加不明顯。
2.1.3培養基中蔗糖濃度的影響于莎巴珍珠果實成熟時取樣的種子分別培養在基本培養基附加2,5,10和20%蔗糖的培養基上,二個月后測量胚長。在這四種蔗糖濃度的培養基一匕胚的生長隨著蔗糖濃度的增加而受到抑制。在2%蔗糖培養基上培養后胚長最大,而在20%蔗糖培養基上胚的生長完全受到了抑制。胚的形態發育亦隨著蔗糖濃度的降低而得到促進,如在2%蔗糖濃度培養基上胚的形態以子葉胚為主,而在20%蔗糖濃度培養基上則以心形胚為主。
