蛋白質(zhì)相互之間的影響以及作用
隨著相關(guān)研究人員對(duì)生命跡象的不斷研究，我們也開始動(dòng)植物體內(nèi)的元素進(jìn)行研究，像細(xì)胞、基因以及蛋白質(zhì)等都是大家研究的對(duì)象，目前我國已經(jīng)在這些領(lǐng)域取得了顯著的成就，尤其是對(duì)蛋白質(zhì)的研究，使用定氮儀的發(fā)明更是加快了研究的步伐。因此, 對(duì)于蛋白質(zhì)相互作用的研究就成為蛋白質(zhì)組學(xué)中最主要研究內(nèi)容之一,迄今已發(fā)展了包括經(jīng)典的噬菌體展示技術(shù)、酵母雙雜交系統(tǒng)以及新近發(fā)展并廣泛應(yīng)用的串聯(lián)親和純化和熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)、表面等離子共振技術(shù)等多種有效的研究蛋白質(zhì)間相互作用的高通量分析方法,為蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
由于蛋白質(zhì)間的識(shí)別與結(jié)合主要取決于局部肽段中少數(shù)幾個(gè)氨基酸,所以用受體蛋白對(duì)隨機(jī)肽庫進(jìn)行親和篩選,就能得到之結(jié)合的短肽序列,根據(jù)此短肽的序列,就可以得到與目的蛋白相互作用所依賴的氨基酸殘基,從而可以進(jìn)一步研究蛋白質(zhì)之間的分子識(shí)別,酶與底物的結(jié)合等等,突破了傳統(tǒng)研究蛋白質(zhì)相互作用時(shí)需對(duì)其結(jié)構(gòu)詳盡了解的限制。近年來質(zhì)譜技術(shù)發(fā)展迅速,其功能強(qiáng)大且靈敏度高,常用來鑒定相互作用的蛋白質(zhì)復(fù)合體或復(fù)合體亞基,但通常難以獲得足夠量純化的蛋白質(zhì)復(fù)合體,成為質(zhì)譜在這方面應(yīng)用的一個(gè)限速步驟。
表面等離子共振是一種物理光學(xué)現(xiàn)象,當(dāng)一束平面單色偏振光以一定角度入射到鍍?cè)诓ＡП砻娴谋咏饘倌ど习l(fā)生全反射時(shí),若入射光的波向量與金屬膜內(nèi)表面電子的振蕩頻率相一致,光線即被耦合入金屬膜引發(fā)電子共振,即表面等離子共振。由于共振的產(chǎn)生,導(dǎo)致反射光的強(qiáng)度在某一特定的角度大大減弱,反射光消失的角度稱為共振角,共振角隨金屬表面折射率的變化而變化,而折射率的變化又與金屬表面結(jié)合物的分子質(zhì)量成正比。由此,在20世紀(jì)90年代發(fā)展了應(yīng)用SPR原理檢測生物傳感芯片上的配位體與分析物作用的一種新技術(shù)表面等離子共振。在該技術(shù)中,待測生物分子被固化在生物傳感芯片上,使另一種被測分子的溶液流過表面,如二者發(fā)生相互作用, 就會(huì)引起芯片表面折射率的變化,從而導(dǎo)致共振角的改變,通過檢測該共振角的變化,就可實(shí)時(shí)監(jiān)測分子間的相互作用。
機(jī)體細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間相互交叉作用形成網(wǎng)絡(luò),構(gòu)成各項(xiàng)生理活動(dòng)的基礎(chǔ)。因此了解、闡明蛋白質(zhì)之間相互作用的機(jī)制意義重大。從近期國際上蛋白質(zhì)研究的發(fā)展動(dòng)向可以看出,揭示蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系,建立相互作用的網(wǎng)絡(luò)圖,已成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域中的熱點(diǎn),覆蓋了從微生物到動(dòng)植物的各個(gè)領(lǐng)域。出于研究的需要,各種新的研究技術(shù)不斷涌現(xiàn),尤其隨著生物信息學(xué)的出現(xiàn),多種方法技術(shù)并存,相互間交叉互補(bǔ),已愈來愈成為研究蛋白質(zhì)相互作用研究方法的主要特點(diǎn),對(duì)于準(zhǔn)確理解蛋白質(zhì)功能、揭開各種細(xì)胞活動(dòng)的奧秘具有重大的意義,勢(shì)必會(huì)引導(dǎo)蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展進(jìn)入一個(gè)全盛時(shí)期。中國糧油儀器網(wǎng) http://m.51wenwangwen.com/
